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答：一般不推荐使用胰酶消化，胰酶消化液消化能力太强。容易消化过度，以至于功亏一篑。对于脆弱而又易消化的组织推荐使用EDTA消化即可，而对于肿瘤之类的模基生物使用自主研发的肿瘤消化液。该消化液中包含多种酶，包括分散酶，胶原酶，二型胶原酶等。
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答：实验前半小时打开紫外线灯灭菌，实验开始时关闭。实验时取放物品时不要越过敞开容器上方。选用洁净无污染的溶液、器皿。实验所用冰块虽以超纯水制成，进入超净台前需喷洒酒精但仍有细菌残留风险。避免实验所用溶液与其接触，同时冰块融化度高时立即更换。
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3. 小鼠小肠类器官与小鼠结肠类器官区别在哪？该如何分辨？
答：出芽大而腔体小的是小鼠小肠类器官。腔体大而出芽小的是小鼠结肠类器官。新手培养类器官时可根据图示分辨。
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答：在定期换液情况下，小鼠小肠、结肠类器官培养14天左右就会渐渐开始凋亡。因此在培养14天前需要传代培养。
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答：用5MMol/L浓度的EDTA，小鼠小肠，小鼠结肠组织脆弱易解离。使用类器官消化液或组织消化液容易使其活性丧失。若是肿瘤组织一类不易消化的则不适合用EDTA作为消化液。
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答：在类器官培养中，消化是很重要的一点，那么如何判断消化完成呢？在小鼠结肠类器官原代建立实验中。消化至20分钟我们用移液枪轻轻吹打混合液，并取20μl左右做镜检。显微镜下可看到脱落的隐窝时即可停止消化。
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7. 在类器官原代建立中为什么有的孔板类器官多，有的孔板类器官少？
答：这是混合不均所致，基质胶相对培养基较粘，为避免混匀时气泡产生，细胞沉淀可先用适量的完全培养基重悬，再加入基质胶混匀，保持基质胶占比大于70%即可。混合过程切勿产生气泡，否则影响后续观察以及类器官培养状态，混匀过程可以调小量程，吸取的液体不要全部吹出。基质胶浓度高时，移液器吸入的体积可能不准，可用无菌剪剪去枪头前端后再去吸入基质胶。
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8. 使用 Mogengel&ABW 基底膜基质培养的细胞，如果需要进行切片或者免疫组织化学及免疫荧光检验，该怎样固定呢？如何避免解聚？
答：可以使用 2%浓度的多聚.甲.醛进行固定。为避免固定后出现解聚的情况，可以加入 1%浓度的戊.二.醛。戊.二.醛作为固定剂，常用于电镜观察。如果用户需要进行免疫荧光检验，加入戊.二.醛后，会出现明显的背景荧光。为了解决这一问题，我们建议用户在固定之后，使用 NaBH4 进行淬灭。NaBH4 极易气泡，进行该步骤时，必须在水平操作台上小心操作，避免晃动，尽量减少气泡的形成。另外，用户也可以尝试使用较低浓度的戊.二.醛进行固定，如 0.1%到 0.5%，浓度越低，背景荧光信号越少。
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9. Mogengel&ABW 基底膜基质会有自发荧光吗？
答：Mogengel&ABW 基底膜基质是一种蛋白混合物，经过透析处理后溶解在 DMEM 培养基中。为防止微生物污染，培养基中添加了庆大霉素。所以Mogengel&ABW 基底膜基质可能引发荧光的组分包括其中的蛋白质成分，维生素成分以及庆大霉素（氨基糖苷类抗生素）。如果需要使用荧光检测细胞生长状态，建议使用者建立对照实验，在所需要的波长条件下进行对比，以便排除背景荧光。
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10. Mogengel&ABW 基底膜基质的折射率是多少？
答：20℃ 条件下，Mogengel&ABW 基底膜基质的折射率是 1.3406 到 1.3407，相对折射率为1.0056（同等条件下，水的折射率为 1.333）。
