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1. 未使用完的Mogengel&ABW 基底膜基质应该怎样保存的?
答:与细胞培养基或缓冲液混合过但未使用完的Mogengel&ABW 基底膜基质,不建议保留再用。
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2. 未稀释的Mogengel&ABW 基底膜基质中出现的沉淀应该怎么样处理?
答:4℃下低速离心,去除沉淀物 。
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3. 为什么细胞没有贴壁?Mogengel&ABW 基底膜基质也脱落了?
答:首先需要检查细胞的接种浓度是否过高,Mogengel&ABW 基底膜基质的用量应等同于细胞培养体系中培养基的用量。如果Mogengel&ABW 基底膜基质被稀释到过低的浓度,形成的胶体容易从组织培养器皿表面分离。
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4. Mogengel&ABW 基底膜基质可以反复冻融吗?
答:建议用户第一次融化后按照单次用量进行分装,保存。
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5. 为什么Mogengel&ABW 基底膜基质在37°C成胶,而在4°C时却呈液体状态?
答:Mogengel&ABW 基底膜基质是一种从小鼠骨肉瘤中提取的重组基底膜, 新鲜提取的原料中主要包括以下成分:层粘连蛋白,IV型胶原, 巢蛋白,基底膜聚糖、表皮生长因子、类胰岛素生长因子及其他生长因子。这些蛋白构成了 Mogengel&ABW 基底膜基质的基本结构。在22℃-37℃温度条件下,大分子间的共价键可以结合,促使 Mogengel&ABW 基底膜基质形成凝胶。而在低温条件(如4℃)下,由于没有足够的能量促使共价键结合,所以 Mogengel&ABW 基底膜基质呈现液体状态。
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6. Mogengel&ABW 基底膜基质可以诱导ES/iPS细胞分化吗?
答:可以的,已经有相关文章表明Mogengel&ABW 基底膜基质可以用于ES/iPS细胞的分化研究。
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7. 为什么我的Mogengel&ABW 基底膜基质很粘稠?
答:基质胶的蛋白浓度越高,胶体越粘稠。如果浓度高于13.0 mg/mL,基质胶会显得非常厚重。Mogengel&ABW 基底膜基质基质胶产品在未稀释前都会比较粘稠。粘稠的高浓度Mogengel&ABW 基底膜基质(Mogengel&ABW 基底膜基质 HC)不稀释也可以直接使用,如用于培养肿瘤细胞和/或血管生成因子,注射于小鼠体内后,细胞可以保持原位,便于原位分析和/或以后的切除;或者稀释后,按照标准浓度的Mogengel&ABW 基底膜基质产品使用方法使用,具体稀释浓度根据实验需求确定。
除因为产品本身浓度高而粘稠外,基质胶的状态还与运输过程中温度的变化和储藏条件有关。整个运输过程中必须使用干冰冷藏。如果储藏Mogengel&ABW 基底膜基质的冰箱带有自动除霜功能,冰箱除霜过程中升温,可能使基质胶成胶。所以,切忌将Mogengel&ABW 基底膜基质储藏于此类冰箱中。为保证ABW® Matrigengel 基底膜基质的使用效果,冻融次数应该尽可能减少。拿到新的Mogengel&ABW 基底膜基质后,请按照单次用量进行分装。每次融化操作,Mogengel&ABW 基底膜基质都应该放置于冰上。如果Mogengel&ABW 基底膜基质在成胶状态被冻住,再次融化时将不能成恢复液体。
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8. 应该如何对Mogengel&ABW 基底膜基质移液操作?
答:推荐使用预冷的移液器或者注射器操作,移液管、枪头同样需要预冷。吸液时不要触及瓶子底部;分液时切忌过快、用力过猛。如果使用移液管(Pipets),需要分液5mL时,应该吸取6mL,分液到移液管内仍有1mL时即停止;如果使用自动移液器(Pipetman),按压到第二档位吸液,然后按压到第一档位进行分液。
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9. 怎样稀释Mogengel&ABW 基底膜基质?
答:使用冰上预冷的无血清培养基或者PH 7.4的PBS。
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10. Mogengel&ABW 基底膜基质胶块在体内可以维持多长时间?
答:基质胶胶块可以在体内维持至少一周的时间。