Isletic Guidan Inducer Medium Kit
Isletic Guidan series PSC来源的胰岛类器官诱导试剂盒
♢产品是无菌的，产品外包装是非无菌的，请在使用前对产品外包装充分消毒；
♢ 产品一经拆封，应妥善存放以确保产品的无菌性；
1、 产品描述
Isletic Guidan series PSC来源的胰岛类器官诱导试剂盒是一款基于人多能干细胞（PSC）定向分化的即用型、模块化培养系统。本试剂盒经过精心优化，可在26天内，高效诱导PSC生成结构完整、功能成熟的胰岛样类器官。所产生的类器官不仅同时高表达关键胰腺内分泌标志物（NKX6.1、Insulin、Glucagon、Somatostatin），更具备葡萄糖刺激胰岛素分泌（GSIS）的核心生理功能，为糖尿病研究、药物筛选和细胞治疗开发提供了前所未有的高效、可靠且功能完备的体外模型。
2、 产品信息
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产品名称 |
产品货号 |
试剂盒组分 |
规格 |
试剂盒组分货号 |
存储/运输 |
保质期 |
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Isletic Guidan series PSC来源的胰岛类器官诱导试剂盒 |
ML-0827I01 |
内胚层诱导培养基-1 Definitive Endoderm Induction Medium -1 |
15 mL |
ML-0827I01A |
-20°C |
24个月 |
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内胚层诱导培养基-2 Definitive Endoderm Induction Medium -2 |
45 mL |
ML-0827I01B |
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原始肠管诱导培养基 Primitive Gut Tube Induction Medium |
30 mL |
ML-0827I01C |
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后前肠诱导培养基 Posterior Foregut Induction Medium |
60 mL |
ML-0827I01D |
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胰腺祖细胞诱导培养基 Pancreatic Progenitor Induction Medium |
60 mL |
ML-0827I01E |
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胰腺内分泌祖细胞诱导培养基 Pancreatic Endocrine Progenitor Induction Medium |
45 mL |
ML-0827I01F |
-20°C |
24个月 |
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胰岛细胞诱导培养基 Islet Cell Induction Medium |
45 mL |
ML-0827I01G |
3、 其他自备材料和试剂
a) 分化前维持干细胞培养需要使用的试剂耗材
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产品名称 |
产品货号 |
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干细胞金牌基质胶 |
082777/0827775 |
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StemGrowth series多能干细胞金牌培养基 |
ML-0827S04 |
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StemGrowth series 消化液 |
ML-0827S08 |
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StemGrowth series 抗胁迫补充剂 1000x |
ML-0827S10 |
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TC处理的6孔板 |
- |
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TC处理的12孔板 / 24孔板 |
- |
b) 启动分化需要使用的试剂耗材
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产品名称 |
产品货号 |
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Isletic Guidan series PSC来源的 胰岛类器官诱导试剂盒 |
ML-0827I01 |
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StemGrowth series 水解酶温和消化液 |
ML-0827S03 |
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超低黏附96孔U底板 |
ML-0827P12 |
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超低黏附6孔培养皿 |
ML-0827P13 |
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8-12通道排枪 |
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加样槽 |
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低速离心甩板机 |
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圆周摇床 |
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高糖DMEM |
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4、 实验前建议
产品是无菌的，产品外包装是非无菌的，请在使用前对产品外包装充分消毒。
产品一经拆封，应妥善存放以确保产品的无菌性。
5、 Mogengel推荐用细胞系
H1、H9、HN4、iPSCs帕金森患者来源DY043、iPSC-EGFP等。
6、 新手须知
注意事项：在使用时应始终穿戴防护服，在处理诸如人体细胞或其他生物及有害物质时应遵循安全的实验室规程。在准备以下材料时，请采用无菌技术。如果准备的体积不同于所列示例中的体积，则需相应调整。
仅用于科学研究。
7、 PSC来源的胰岛类器官诱导培养
注意：涉及主要人体组织材料的研究必须遵循所有相关的机构和政府法规。在收集主要人体组织材料之前，必须获得所有受试者的知情同意。
a) 贴壁细胞启动分化使用程序
a.1 Isletic Guidan series PSC来源的胰岛类器官诱导试剂盒前提前一天解冻，解冻后应及时使用
注：配置要求注意无菌保存。
a.2 PSC细胞培养和内胚层诱导
1、 根据不同PSC细胞系的特性从ESC＜60P、iPSC＜50P中复苏一支细胞、经过两次高质量传代记作复苏后P3（干细胞培养操作见Mogengel®多能干细胞金牌培养基系列提供的PSC培养SOP）。
2、 注意！PSC克隆出现问题、自分化及漂浮的情况应再启动复苏扩增一株，不可直接用于分化。
3、 PSC传代后观测细胞形态成小岛状克隆，细胞克隆密度约为80%、无单细胞胁迫生长样及应激态球状克隆团即可进行诱导。弃去干细胞培养基后加入内胚层诱导培养基-1（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL）。
4、 24h后进行弃去内胚层诱导培养基-1培养基，加入内胚层诱导培养基-2直到细胞克隆密度达到100%后进入第二阶段，第一阶段诱导时间预计4天
a.3原始肠管诱导
吸弃第一阶段内胚层诱导培养基后，加入原始肠管诱导培养基，每隔24h进行全换液（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL），持续诱导2天。
a.4后前肠诱导
吸弃第二阶段原始肠管诱导培养基后，加入后前肠诱导培养基，每24h进行全换液（6孔板每孔加2 mL，12孔板每孔加1 mL，24孔板每孔加0.5 mL），持续诱导4天。
a.5胰腺祖细胞诱导
1、 后前肠诱导结束后弃去培养基，用DPBS快速洗涤细胞一遍后每孔用500 μL（12孔板用量）的Mogengel®水解酶温和消化液/货号: ML-0827S03消化10-15分钟，观测细胞变圆皱缩变亮、摇晃可见少量细胞脱离基质即可使用等量的高糖DMEM终止消化。重悬细胞后收集于15 mL或50 mL离心管中，将细胞悬液300g离心5分钟弃除上清后，加入12 mL胰腺祖细胞诱导培养基重悬并补充1000x到1x的抗胁迫补充剂/货号：ML-0827S10。
2、 将细胞悬液 + 1x抗胁迫补充剂加入加样槽中或10 cm培养皿，使用排枪每孔100 μL加入超低粘附96孔U底培养板中，封口膜包好后水平甩板机1500 rpm离心2分钟，拆掉封口膜后放37度细胞培养箱培养过夜，第二天每孔加入100 μL胰腺祖细胞诱导培养基，第三天完全吸弃培养基，加入100 μL胰腺祖细胞诱导培养基。待细胞成球后，也可选择用宽口枪头转移到超低吸附/未经贴壁处理的6孔板中（需要转移到摇床培养），方便后续换液。细胞成球后每隔48h用胰腺祖细胞诱导培养基进行全换液。在胰腺祖细胞诱导培养基持续6天后更换为胰腺内分泌祖细胞诱导培养基。
a.6胰腺内分泌祖细胞诱导
吸弃胰腺祖细胞诱导培养基后，加入胰腺内分泌祖细胞诱导培养基，每48h进行全换液（6孔板每孔加2 mL，96孔U底板加100 μL）持续诱导6天。
a.7胰岛细胞诱导
吸弃胰腺内分泌祖细胞诱导培养基后，加入胰岛细胞诱导培养基，每48h进行全换液（6孔板每孔加2 mL，96孔U底板加100 μL）持续诱导4天。即可用于鉴定和下游实验。
V1.0版
更新时间：2026/1/4
