模基生物人脑胶质瘤类器官培养基套装

产品描述

胶质瘤是一种起源于神经胶质细胞的脑肿瘤，使用类器官技术可以帮助研究人员更好地理解肿瘤的行为，并测试潜在治疗方案的有效性。模基生物人脑胶质瘤类器官培养基套装（Human Glioblastoma Organoid Kit）是一种化学定义的细胞培养基，用于建立高度仿真、操作简便、稳定的人脑胶质瘤组织来源的类器官模型。

产品信息

其他自备材料和试剂

人脑胶质瘤类器官培养基使用说明

1. 收到人脑胶质瘤类器官基础培养基后，将培养基置于四度冰箱进行解冻；

2. 将解冻后培养基上下颠倒充分混匀，在无菌的生物安全柜或超净工作台中将培养基进行分装，推荐分装成

10 mL规格；

3.将分装后的培养基储存于-20℃，使用时拿出分装后的培养基解冻。

注意：

² B因子可在2-8℃避光储存，现用现加。

²人脑胶质瘤类器官基础培养基需储存于-20℃，有效期两年，注意避免反复冻融；

² 解冻后类器官基础培养基可在 4°C 储存，建议在两周内使用；

² 类器官培养基中内含有细菌抗生素。 

原代人脑胶质瘤类器官的建立与传代培养

注意：涉及原代人体组织材料的研究必须遵守所有相关的机构和政府法规。在收集主要人体组织材料之前，必须获得所有受试者的知情同意。

Ø 原代人脑胶质瘤类器官的建立

1. 在模基生物活组织保存液中收集原代人脑胶质瘤组织。

2. 将组织放入小皿中，用含有1%双抗的预冷DPBS 清洗两次组织。

3. 在含有1%双抗的DPBS中使用外科剪刀或手术刀将组织坏死部分剔除，留下透明的胶质瘤组织并剪切成 1 mm的小块（切勿撕扯）。

4. 去除碎片：用模基生物类器官防粘附润洗液润洗过的宽口枪头组织混悬液转移入润洗过的15 mL 离心管中静置，约5 min后碎片沉底，吸走上清。

5. 裂解红细胞：在组织块沉淀中加入3-5 mL红细胞裂解液在摇床上震荡5 min，加入5mL模基生物上皮类器官基础培养基静置5 min后，弃去上清。

6. 在组织块沉淀中加入人脑胶质瘤类器官基础培养基，混悬后用润洗过的宽口枪头将混悬液接种到超低粘附六孔板中，每孔15-25个胶质瘤块，接种完成后加入人脑胶质瘤类器官培养因子B。

7. 将接种完成后的培养板放入 37℃二氧化碳恒温培养箱中，静置1小时，静置结束后置于水平摇床上摇晃

80 rpm孵育，以促进类器官的形成，便于增加营养和氧气的扩散。

8. 每隔两天换一次液。第一周会脱落很多细胞，培养基容易浑浊。注意：换液时可45^°倾斜培养板，用润洗过的宽口枪口吸走培养基上清。

9. 肿瘤块一般在10-30天形成胶质瘤类器官。

Ø 人脑胶质瘤类器官的传代培养

1. 用精细解剖剪和镊子将类器官剪为直径约0.5 mm的小块进行繁殖，以避免类器官内核缺氧死亡。

2. 剪过的组织块转移在超低粘附六孔板中加入人脑胶质瘤类器官培养基，将接种完成后的培养板放入 37℃二氧化碳恒温培养箱中，置于水平摇床上80rpm摇晃孵育。

                                                                     更新日期：2025年2月13日